梅毒螺旋体危害评估.doc

苍白（梅毒）密螺旋体危害评估报告 1．危害程度分类 1.1分类等级 根据《中华人民共和国传染病防治法》，苍白（梅毒）密螺旋体属于乙类传染病。在卫生部2006年公布的《人间传染的病原微生物名录》中将丙型肝炎病毒列为危害程度第三类病原微生物。运输包装仅病毒培养物为B类，UN编号为UN3373。 1.2不同实验室操作生物安全实验室级别要求 根据《人间传染的病原微生物名录》要求：苍白（梅毒）密螺旋体血清学检测属于未经培养的感染材料的操作，应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的实验室中进行。 2．背景资料 2.1一般生物学特性 梅毒螺旋体细长，5～15×0.1～0.2um，形似细密的弹簧，螺旋弯曲规则，平均8～14个，两端尖直。电镜下显示梅毒螺旋体结构复杂，从外向内分为：外膜（主要由蛋白质、糖及类脂组成）、轴丝（主要由蛋白质组成）、圆柱形菌体（包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物）；一般染料不易着色。梅毒螺旋体有生活发育周期，分为颗粒期、球形体期及螺旋体期，平均约30小时增殖一代，发育周期与所致疾病周期、隐伏发作及慢性病程有关。 2.2对外界环境的稳定性 梅素螺旋体对温度、干燥均特别敏感，离体干燥1～2小时死亡，41℃中1小时死亡，对化学消毒剂敏感，1～2%石炭酸中数分钟死亡，对青霉素、四环素、砷剂等敏感 2.3致病性 人是梅毒的唯一传染源，由于感染方式不同可分先天性梅毒和后天性梅毒。前者是患梅毒的孕妇经胎盘传染给胎儿的；后者是出生后感染的，其中95%是由性交直接感染，少数通过输血等间接途径感染。 2.3.1 先天性梅毒 又称胎传梅毒。梅毒螺旋体经胎盘进入胎儿血循环，引起胎儿全身感染，螺旋体在胎内儿脏（肝、脾、肺及肾上腺）及组织中大量繁殖，造成流产或死胎，如胎儿不死则称为梅毒儿，会出皮肤梅毒瘤、骨膜炎、锯齿形牙、神经性耳聋等症状。 2.3.2 后天获得性梅毒 依其传染过程可分为三期： 初期梅毒：梅毒螺旋体侵入皮肤粘膜约三周后，在侵入局部出现无痛性硬结及溃疡，称硬性下疳。局部组织镜检可见淋巴细胞及巨噬细胞浸润。下疳多发生于外生殖器，其溃疡渗出物含有大量梅毒螺旋体，传染性极强。下疳常可自然愈合，约2～3个月无症状的隐伏期后进入第二期。 二期梅毒：此期的主要表现为全身皮肤粘膜出现梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他器官。在梅毒疹及淋巴结中有大量螺旋体。不经治疗症状一般可在3周～3个月后自然消退而全愈；部分病例经隐伏3～12个月后可再发作。二期梅毒因治疗不当，经过5年或更久的反复发作，而进入三期。 三期梅毒：主要表现为皮肤粘膜的溃疡性损害或内脏器官的肉芽肿样病变（梅毒瘤），严重者在经过10～15年后引起心血管及中枢神经系统损害，导致动脉瘤、脊髓痨及全身麻痹等，此期的病灶中螺旋体很少，不易检出。 一、二期梅毒又统称为早期梅毒，此期传染性强而破坏性小。三期梅毒又称为晚期梅毒，该期传染性小，病程长、而破坏性大。 当螺旋体从体内清除后仍可再感染梅毒，而且仍可出现一期梅毒症状。此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内产生的免疫力有关，如机体免疫力强，螺旋体能变成颗粒形或球形，在体内一些部位潜伏起来，一旦机体免疫力下降，螺旋体又可侵犯体内某些部位而复发。 2.4传播途径： 2.4.1 性接触：这是梅毒病因来源的主要传染途径。未经治疗的梅毒病人在感染梅毒后的1年内传染性为最强，随着病期的延长，传染性越来越小，到感染后4年，通过性接触一般无传染性。 2.4.2 胎盘感染：患梅毒的孕妇可以通过胎盘使胎儿受染，一般认为梅毒的病因主要感染发生在妊娠4个月以后。病期超过4年未经治疗的梅毒妇女，虽然有性接触，一般也不会传染，但妊娠时仍可传染给胎儿，病期越长，传染性越小。 2.4.3 不良卫生习惯：梅毒的病因可以通过少数性接触以外的途径受传染，如接吻、哺乳;接触有传染性损害病人的日常用品，如衣服、毛巾、剃刀、餐具、烟嘴等，也可传染。 2.4.4 血液感染：梅毒患者、潜伏梅毒及隐性梅毒血清具传染性，通过输血及共用针头可传染他人。 2.5梅毒的预防、诊断和治疗 2.5.1预防 1.加强卫生宣传教育，反对不正当的性行为； 2. 疑病人均应进行预防检查，做梅毒血清试验，以便早期发现新病人并及时治疗； 3．现梅毒病人必须强迫进行隔离治疗，病人的衣物及用品，如：毛巾，衣服，剃刀，餐具，被褥等，要在医务人员指导下进行严格消毒，以杜绝传染源； 4．踪病人的性伴侣，包括病人自报及医务人员访问的，查找病人所有性接触者，进行预防检查，追踪观察并进行必要的治疗，未治愈前配偶绝对禁止有性生活； 5．可疑患梅毒的孕妇，应及时给予预防性治疗，以防止将梅毒感染给胎儿；未婚男女病人，未经治愈前不能结婚。 2.5.2实验室检查及其诊断 临床表现诊断症状，体征及应用梅毒螺旋体明胶凝集试验、梅毒血清试验、基因诊断技术检测梅毒螺旋体。 2.5.3梅毒螺旋体的治疗     1．早期梅毒：包括一期、二期和病期不足两年的潜伏梅毒患者，可给予青霉素肌肉注射，每侧臀部120万单位，共240万单位，只注射一次。 2．晚期梅毒：包括有三期皮肤、粘膜、骨损害等患者，病期在两年以上的潜伏梅毒，心血管梅毒和神经梅毒等。对于良性晚期梅毒(血管、粘膜及骨等)可予以普鲁卡因青霉素G肌肉注射，每日一次，每次60万单位，共15次，总剂量900万单位。或用苄星青霉素每周肌肉注射一次，每次240万单位，共三次，总量720万单位。 3. 抗生素：青霉素、红霉素类、四环素类。 3．从事实验室活动的危险性分析及相应的预防措施 3.1实验室实验活动背景资料 本实验室主要从事HBV/HCV/HIV 病毒及梅毒螺旋体的血清学检测。 梅毒螺旋体筛查实验: 酶免法(ELISA) 3.2可能危害 在实验操作过程中，包括接收样本时样本包装密封性不好造成样本泄露；操作过程中如打开容器盖时样本外溅，加样、孵育、震荡、分离保存血清等时由于操作不慎导致样本溅出、离心管破裂崩溅、气溶胶等。实验室工作环境的污染，实验人员如果接触污染的实验仪器表面、冰箱、加样器、实验台、门把手及实验废弃物等均可能被感染。 3.3预防及处置措施 3.3.1预防 1) 检测过程均应在生物安全防护Ⅱ级实验室内进行。 2) 操作者在实验全过程包括样品接收，都应穿戴好一切生物安全防护装备，一次性的口罩、帽子、双层乳胶手套，防护衣、必要时配戴防护镜等，操作全过程应严格执行实验室的标准操作规程（SOP）。 3) 尽量避免在实验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺伤。如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进行消毒处理。 4) 如接触物传染性危险大，可戴双层（两付）手套以增加保护。操作时手套破损，应立即丢弃、洗手并戴上新手套。 5) 禁止采用口腔吸液管，必须使用移液器来操作实验室的所有液体。 6) 工作完毕，要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1%~0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上； 7) 工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手。 8) 血清（血浆）样本均应严格按要求保存，HIV抗体初筛阳性样品应做好标记单独保存，采用WHO三级包装系统，样本置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样本的编号；将试管放入专业带盖的坚固容器内，在处理和运输过程中防止受到外力挤压，以防标本试管破碎污染环境；在试管周围垫有缓冲吸水；应在2-8℃条件下运送，运输箱外有明显的黄色“当心感染”标识。 3.3.2处置措施 1) 所有的血液、血清（血浆）均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。应按操作未知的有传染风险样品一样，小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。 2) 接收样本时，核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏，如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，若样本外漏到标本容器外面，应立即用浸有0.5%含氯消毒液的多重软布及75%酒精擦拭标本容器，必要时通知重新留取标本。打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。废弃的标本视为高危物质放置到高压灭菌锅内消毒，同时立即更换污染的手套，污染的手套也应放到高压灭菌锅内灭菌。 3) 在进行操作时，若发生液体外溅，应将被溅的地方用0.5%含氯消毒液浸泡的物质覆盖，待消毒液起作用10-15分钟后清理该地方，移走吸水性物质，并用75%酒精及清水多次擦拭该地方。所有实验用品应按污染物质处理，放入高压灭菌锅内灭菌。 4) 在离心过程中，若发生离心管破裂及样本外溅，应立即停止离心，待离心机自动停止并发出提示信号30分钟后，确保穿戴好一切防护用品后，方可打开离心机盖，用止血钳子夹出离心的碎片，被样本污染的地方，防置浸泡有0.5%含氯消毒剂的吸水性物质，待消毒剂起作用后10-15分钟再清理污染处，移走吸水性物质，并用75%酒精多次消毒污染处所有消毒处理用过的物品应按高危物质处理，放入高压灭菌锅内灭菌。 5) 如果在操作过程中将待检测的血液、体液等样本溅洒于皮肤粘膜表面时，应立即用自来水、清水或生理盐水反复冲洗；如溅入眼睛、口腔等部位，应用自来水、清水或生理盐水长时间彻底冲洗（30分钟）；如发生皮肤粘膜针刺、切割伤、刮伤等出血性损伤，应立即挤出损伤局部的血液，然后用自来水、清水或生理盐水等彻底冲洗，再用碘伏消毒创面；如衣物被污染，应尽快脱掉被污染的衣物，进行消毒处理；如有高危的意外事故发生，除进行局部处理外，同时应立即采取预防措施，包括对其随访、HIV检测、休息并暂时离开原岗位3个月，按医嘱服用抗HIV药物进行预防。 4．实验室职业暴露后的处理 发生意外事故时，应立即进行紧急处理，并报告实验室负责人。 1) 皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤处的血液，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。 2) 皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。 3) 粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。 4) 衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。 5) 污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序。 5．工作人员的预防接种和工作人员素质 5.1工作人员的预防疫苗 5.1.1目前尚无有效疫苗预防其感染。 5.1.2实行健康监测报告，实验室人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室工作。如遇实验室人员暴露情况出现，当时除按实验室突发事件处理程序进行处理以外，同时进行抗生素预防治疗，推荐长效青霉素240万单位，每周一次，每侧臀部注射120万单位/次，连续注射两周。对青霉素过敏者可选用红霉素等。分别在暴露后即刻、1个月、3个月进行梅毒抗体检测 5.2工作人员素质 实验室共有技术人员9名，其中申请进入BSL-2实验室9名。所有技术人员均参加过生物安全培训，熟知梅毒实验SOP文件及流程。 6．评估结论 7. 评估结论 结合我站实验室的状况（BSL-2），依据卫生部《病原微生物实验室生物安全管理条例》中的相关要求，符合开展微生物病原体检测的条件。 11